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NEWS比较分析ag尊龙凯时大肠杆菌分离与计数培养基
来源:霍琛邦 日期:2025-02-15ag尊龙凯时的1LB琼脂是一种非选择性的固体培养基,广泛应用于分子生物学领域中大肠杆菌的培养,此外,也适用于大肠杆菌的活化和纯菌计数。在培养基中加入特定抗生素(如青霉素、四环素和卡那霉素)可以实现对转基因大肠杆菌的筛选。
伊红美蓝琼脂(EMB)作为一种弱选择性培养基,不仅适合分离培养和计数大肠杆菌,还用于大肠菌群的分离。由于大肠杆菌强烈发酵乳糖并产生酸,形成的菌落呈紫黑色,并具有绿色金属光泽(有些菌落则无金属光泽)。相比之下,大肠菌群的乳糖发酵产酸能力较弱,菌落多呈红色或粉红色,无金属光泽。不发酵乳糖的其他肠道菌群则显示无色或淡红色菌落。由于其分离效果有限,该培养基通常用于大肠杆菌和大肠菌群的多管发酵法中阳性管的确认。
麦康凯琼脂是检验和分离肠道菌的常用培养基,药典中用于检测大肠杆菌,并在食品标准中用于肠道致病菌的分离。该培养基中含有较多的胆盐和结晶紫,这对于大多数革兰氏阳性菌具有显著的抑制作用。由于大肠杆菌大量发酵乳糖并产生酸,其菌落呈桃红色,并在周围形成明显的沉淀环;大肠菌群同样具备此性质,菌落也为桃红色。而不发酵乳糖的致病性肠道菌(如志贺氏菌和沙门氏菌)则形成无色的菌落。由于其对大肠杆菌的选择性较弱,当样品中大肠菌群含量较高时,分离大肠杆菌的效果不如预期。
大肠杆菌显色培养基/TBX培养基以其酶底物法原理,提供对大肠杆菌分离和计数的高度特异性。大肠杆菌特有的β-葡萄糖醛酸苷酶能够分解培养基中的底物,使菌落呈现蓝绿色,而大肠菌群及其他多数杂菌则通常表现为无色或其他颜色。大多数革兰氏阳性菌在该培养基中不生长。在干扰菌较多的环境下,该显色培养基的分离率显著高于其他多种培养基,但其价格较高,且极少数不产生β-葡萄糖醛酸苷酶的大肠杆菌(如肠出血性大肠埃希氏菌O157)无法显色。该培养基适用于食品、水源及环境的广泛检测。
哥伦比亚MUG培养基/MUG营养琼脂的工作原理与显色培养基相似,大肠杆菌能特异性地利用β-葡萄糖醛酸苷酶分解MUG,在紫外灯照射下产生荧光,展现强特异性,只有极少数不产生此酶的菌株不会发光。然而,该培养基缺乏选择性,大多数杂菌均可生长,因此一般适用于细菌含量较少的水样中进行大肠杆菌计数。
VRBA-MUG培养基是在VRBA基础上添加了MUG,具有一定的选择性以抑制革兰氏阳性菌的生长。大肠杆菌和大肠菌群在此培育环境中呈紫红色菌落,并形成沉淀环。由于添加了MUG,经过紫外光照射后,大肠杆菌菌落可产生荧光反应,而大肠菌群则不发光。该培养基通常用于食品中大肠杆菌的检验和计数。
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