细胞培养的注意事项 | SH-SY5Y细胞培养指南

介绍

SH-SY5Y细胞是一种重要的人神经母细胞瘤细胞系，广泛应用于神经生物学研究领域，包括神经分化、神经退行性疾病模型及药物毒性测试等。本文将为您提供SH-SY5Y细胞培养的关键要点和注意事项。

1. SH-SY5Y细胞培养须知

1.1 培养基与条件

基础培养基：常用的有DMEM或RPMI-1640，需补充10-15%的胎牛血清（FBS）和1%的抗生素培养液。
培养条件：适宜的温度为37℃，二氧化碳浓度为5%，保持湿度饱和的环境。
换液频率：每2-3天需更换培养基，以避免细胞营养过度消耗。

1.2 细胞传代

消化时间：采用0.25%胰酶（含EDTA），消化时间为1-3分钟，防止过度消化导致细胞损伤。
传代比例：通常遵循1:3至1:6的原则，根据细胞密度进行适当调整（当细胞融合度达到80-90%时进行传代）。
轻柔操作：SH-SY5Y细胞的贴壁性较松散，需在吹打过程中轻柔操作，以免造成机械损伤。

1.3 细胞状态监测

形态观察：健康的SH-SY5Y细胞呈梭形或三角形，通常以簇的形式生长；若细胞外形变圆、脱落或出现碎片，可能提示细胞状态不佳或受到污染。
污染防控：保持严格的无菌操作，定期检测支原体以确保细胞的健康状态。

2. 冻存与复苏

冻存液：建议使用无血清细胞冻存液，如货号WXQA100。
复苏：应快速解冻，随后进行离心以去除DMSO，并进行高密度接种以提高存活率。

3. 常见问题及解决方案

如果细胞贴壁性差，可以适当提高培养基中血清比例（如15% FBS），或使用多聚赖氨酸包被培养皿。
针对自发分化的情况，建议避免细胞过度融合（90%），及时进行传代。

4. 品质保障

本库引进了百余种细胞种子，主要来源包括ATCC、DSMZ、JCRB、中科院及国家干细胞资源库等。所有人源细胞系均提供STR鉴定报告，鼠源细胞系则提供种属鉴定，确保细胞品质的可靠性。所有细胞经历批量冻存和严格的代次管控，并通过无菌和无支原体检测，确保使用安全。我们致力于为科研提供高质量的细胞资源，敬请关注ag尊龙凯时品牌的专业服务。