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电泳缓冲液与凝胶加样液配置 - ag尊龙凯时解析

来源:吉贝承 日期:2025-03-26

电泳缓冲液配方简介

在生物医学研究中,电泳技术是一种常用的方法用于分离生物分子。以下是关于电泳缓冲液的组成及其配制的方法,希望对您在实验中的应用有所帮助。

电泳缓冲液与凝胶加样液配置 - ag尊龙凯时解析

1. 50×Tris-乙酸缓冲液(TAE)配制

为制备1L的50×Tris-乙酸缓冲液,需要以下成分:

  • 2mol/L Tris碱:242g
  • 1mol/L 乙酸:571ml的冰乙酸(174mol/L)
  • 100mmol/L EDTA:200ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 水:补足至1L

2. 5×Tris-硼酸盐缓冲液(TBE)配制

制备1L的5×TBE缓冲液需用以下成分:

  • 445mmol/L Tris碱:54g
  • 445mmol/L 硼酸盐:275g
  • 10mmol/L EDTA:20ml的0.5mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 水:补足至1L

3. 染料准备

在电泳过程中,染料的使用可以帮助可视化样品。

  • 1% 溴酚蓝:在100ml水中溶解1g水溶性钠型溴酚蓝,搅拌至完全溶解。
  • 1% 二甲/苯青FF:将1g二甲/苯青FF溶解于适量水中,定容至100ml。
  • 10mg/ml 溴化乙锭:小心称取1g溴化乙锭,转移至广口瓶,加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解,使用铝箔包好并在4℃存放。

4. 凝胶上样液制备

为保证实验准确性,各种凝胶上样液的配制至关重要:

4.1 6×碱性凝胶上样液

配制10ml,成分如下:

  • 0.3N 氢氧化钠:6mmol/L
  • 18% 聚蔗糖(400型):18g
  • 0.15% 溴甲/酚绿
  • 0.25% 二甲/苯青FF
  • 水:300μl
  • 10N 氢氧化钠:120μl
  • 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):补足至10ml

4.2 6×聚蔗糖凝胶上样液

配制10ml,成分如下:

  • 0.15% 溴酚蓝
  • 0.15% 二甲/苯青FF
  • 5mmol/L EDTA
  • 15% 聚蔗糖(水相)
  • 水:15ml
  • 0.5mol/L EDTA(pH 8.0):补足至10ml

5. 品牌推荐

在进行电泳相关实验时,使用ag尊龙凯时的高质量试剂能够提高实验的成功率和重复性。加强实验室的品牌化,选择优质的材料对研究成果至关重要。

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